文章通过构建带金鱼Tgf2转座子左右臂、斑马鱼肌球蛋白轻链2(Mlyz2)启动子和红色荧光蛋白(RFP)的供体质粒Tgf2-Mlyz2-RFP,与Tg f2转座酶mRNA共同显微注射入团头鲂1～2细胞期受精卵,检测金鱼Tgf2转座子在团头鲂基因组中的整合效率.在团头鲂出膜仔鱼、30d和180 d幼鱼阶段,可在鱼体背部和侧面肌肉观察到荧光,红色荧光蛋白的表达率为48.1％,PCR检测结果显示,金鱼Tgf2转座系统在团头鲂成鱼基因组中的整合效率为31.5％;对5尾阳性团头鲂进行了RT-PCR检测,3尾团头鲂在12个组织均能检测到较高的RFP基因的表达,2尾团头鲂仅在肌肉、皮和肾脏中存在较高的RFP基因的表达,显示RFP基因在不同转基因团头鲂个体中的组织表达存在一定差异;通过检测Tgf2转座子在团头鲂基因组插入位置5'端的侧翼序列,检测出金鱼Tgf2转座系统在转基因团头鲂中的拷贝数至少为2个,每尾鱼的平均拷贝数大约为5个,50％以上插入位点的侧翼序列可找出其它脊椎动物的相关同源性序列.研究结果显示金鱼Tgf2转座子可高效介导基因在团头鲂基因组中插入,为开展团头鲂转基因和基因捕获研究奠定了一定的基础.
作者：郭秀明；黄创新；沈睿杰；蒋霞云；陈杰；邹曙明
来源：遗传 2013 年 35卷 8期
