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目的构建真核细胞内表达的重组质粒PEGFP-hIL-1ra,对角膜内皮细胞进行基因修饰,为构建白细胞介素-1受体拮抗剂(interleukin-1 receptor antagonist,IL-1ra)基因化角膜内皮细胞移植膜奠定基础.方法以人cDNA文库为模板进行PCR扩增,获得人IL-1ra cDNA片断,插入PEGFP-C2载体,构建真核表达质粒PEGFP-hIL-1ra.以阳离子聚合物为介导,对饲细胞培养下的角膜内皮细胞(corneal endothelial cells,CECs)进行体外转染.通过绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)示踪检测转染效率,蛋白免疫印迹检测外源性IL-1ra基因在角膜内皮细胞内表达强度.结果以cDNA文库为模板扩增出hIL-1ra cDNA,通过酶切、DNA测序证实PEGFP-hIL-1ra构建正确.20
作者：袁进；陈家祺；刘祖国；王智崇；周世有
来源：眼科新进展 2006 年 26卷 1期
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