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目的 研究核心蛋白多糖(decorin)对高糖低氧条件下血-视网膜内屏障的保护作用及机制.方法 培养人脐静脉内皮细胞,采用细胞计数试剂盒检测不同浓度decorin对人脐静脉内皮细胞存活率的影响;高糖低氧条件下(25 mmol·L-1右旋葡萄糖+100 μmol·L-1 CoCl2)孵育人脐静脉内皮细胞,通过ELISA检测不同浓度decorin处理后,不同时间点人脐静脉内皮细胞分泌血管内皮生长因子水平.将细胞分为正常对照组(5.5 mmol·L-1右旋葡萄糖)、高糖低氧组(25 mmol·L-1右旋葡萄糖+100 μmol·L-1 CoCl2)、甘露醇对照组(5.5 mmol·L-右旋葡萄糖+ 19.5 mmol·L-1甘露醇)及decorin处理组(25 mmol·L-1右旋葡萄糖+ 100 μmol·L-CoCl2+100 nmol · L-decorin),通过检测跨内皮细胞电阻(transendothelial electrical resistance,TER)、异硫氰酸荧光素标记的右旋糖酐(fluorescein isothiocyanate,FITC-dextran)的渗漏率来评估单层人脐静脉内皮细胞的屏障功能;Western blotting检测内皮细胞间紧密连接蛋白(claudin-5、occludin、ZO-1)及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)的磷酸化水平.结果 细胞计数试剂盒检测发现,10 nmol·L-1、50 nmol·L-、100 nmol·L-1、200nmol·L-1 decorin处理人脐静脉内皮细

作者:李疏凤;王帅;李婷婷;杜珊珊;吴强

来源:眼科新进展 2017 年 37卷 6期

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作者:
李疏凤;王帅;李婷婷;杜珊珊;吴强
来源:
眼科新进展 2017 年 37卷 6期
标签:
核心蛋白多糖 血-视网膜屏障 糖尿病视网膜病变 p38丝裂原活化蛋白激酶 decorin blood-retinal barrier diabetic retinopathy p38 mitogen-activated protein kinase
目的 研究核心蛋白多糖(decorin)对高糖低氧条件下血-视网膜内屏障的保护作用及机制.方法 培养人脐静脉内皮细胞,采用细胞计数试剂盒检测不同浓度decorin对人脐静脉内皮细胞存活率的影响;高糖低氧条件下(25 mmol·L-1右旋葡萄糖+100 μmol·L-1 CoCl2)孵育人脐静脉内皮细胞,通过ELISA检测不同浓度decorin处理后,不同时间点人脐静脉内皮细胞分泌血管内皮生长因子水平.将细胞分为正常对照组(5.5 mmol·L-1右旋葡萄糖)、高糖低氧组(25 mmol·L-1右旋葡萄糖+100 μmol·L-1 CoCl2)、甘露醇对照组(5.5 mmol·L-右旋葡萄糖+ 19.5 mmol·L-1甘露醇)及decorin处理组(25 mmol·L-1右旋葡萄糖+ 100 μmol·L-CoCl2+100 nmol · L-decorin),通过检测跨内皮细胞电阻(transendothelial electrical resistance,TER)、异硫氰酸荧光素标记的右旋糖酐(fluorescein isothiocyanate,FITC-dextran)的渗漏率来评估单层人脐静脉内皮细胞的屏障功能;Western blotting检测内皮细胞间紧密连接蛋白(claudin-5、occludin、ZO-1)及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)的磷酸化水平.结果 细胞计数试剂盒检测发现,10 nmol·L-1、50 nmol·L-、100 nmol·L-1、200nmol·L-1 decorin处理人脐静脉内皮细

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