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目的 探究miR-101对视网膜母细胞瘤增殖及侵袭能力的影响.方法 收集31例视网膜母细胞瘤组织及7例正常视网膜组织.培养人正常视网膜血管内皮细胞系ACBRI-181及视网膜母细胞瘤系HXO-Rb44.Lipofectamine 2000转染HXO-Rb44细胞并分组:阴性对照(normal control,NC)1组[转染microRNA (miR)-101阴性对照物]、miR-101表达组(转染miRNA-101类似物);NC 2组[转染组蛋白-赖氨酸N-甲基转移酶(EZH2)阴性对照序列]、siRNA-EZH2组(转染EZH2siRNA)、siRNA-EZH2+ mimics组(转染EZH2siRNA和miRNA-101类似物)和EZH2+ mimics组(转染EZH2表达载体和miRNA-101类似物).正常HOX-Rb44细胞作为空白组.采用qRT-PCR检测miR-101、EZH2 mRNA表达,Western blot检测EZH2蛋白表达.M TT及Transwell实验分别测定细胞增殖及侵袭能力.荧光素酶报告基因实验确定miR-101和EZH2的靶向关系.裸鼠体内移植实验测定细胞体内增殖能力.结果 与正常视网膜组织和ACBRI-181细胞相比,视网膜母细胞瘤组织及HXO-Rb44细胞中miR-101的相对表达量均明显下调(均为P<0.05).EZH2 mRNA及蛋白在miR-101表达组中的相对表达量均显著低于空白组和NC1组(均为P<0.05).72 ~96 h,miR-101表达组的吸光度(A)值均显著低于空白组及NC1组(均为P<0.01).miR-101表达组侵袭细胞数量

作者:李勇;徐卫星;徐军;李佳

来源:眼科新进展 2018 年 38卷 6期

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作者:
李勇;徐卫星;徐军;李佳
来源:
眼科新进展 2018 年 38卷 6期
标签:
视网膜母细胞瘤 miR-101 EZH2 增殖 侵袭 retinoblastoma miR-101 EZH2 proliferation invasion
目的 探究miR-101对视网膜母细胞瘤增殖及侵袭能力的影响.方法 收集31例视网膜母细胞瘤组织及7例正常视网膜组织.培养人正常视网膜血管内皮细胞系ACBRI-181及视网膜母细胞瘤系HXO-Rb44.Lipofectamine 2000转染HXO-Rb44细胞并分组:阴性对照(normal control,NC)1组[转染microRNA (miR)-101阴性对照物]、miR-101表达组(转染miRNA-101类似物);NC 2组[转染组蛋白-赖氨酸N-甲基转移酶(EZH2)阴性对照序列]、siRNA-EZH2组(转染EZH2siRNA)、siRNA-EZH2+ mimics组(转染EZH2siRNA和miRNA-101类似物)和EZH2+ mimics组(转染EZH2表达载体和miRNA-101类似物).正常HOX-Rb44细胞作为空白组.采用qRT-PCR检测miR-101、EZH2 mRNA表达,Western blot检测EZH2蛋白表达.M TT及Transwell实验分别测定细胞增殖及侵袭能力.荧光素酶报告基因实验确定miR-101和EZH2的靶向关系.裸鼠体内移植实验测定细胞体内增殖能力.结果 与正常视网膜组织和ACBRI-181细胞相比,视网膜母细胞瘤组织及HXO-Rb44细胞中miR-101的相对表达量均明显下调(均为P<0.05).EZH2 mRNA及蛋白在miR-101表达组中的相对表达量均显著低于空白组和NC1组(均为P<0.05).72 ~96 h,miR-101表达组的吸光度(A)值均显著低于空白组及NC1组(均为P<0.01).miR-101表达组侵袭细胞数量

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