目的 探索E3泛素连接酶SYVN1在人晶状体上皮细胞系SRA01/04中对DNA氧化损伤的影响.方法 以中波紫外线(UVB)处理的SRA01/04细胞为研究对象.将培养的SRA01/04细胞分为对照组、OV-SYVN1组、UVB组、UVB+HA组和UVB+OV-SYVN1组,应用 Western blot实验检测SYVN1和XRCC5蛋白的相对表达量,应用Western blot实验检测DNA损伤标志物γH2A蛋白的相对表达量,应用免疫荧光染色检测DNA损伤标志物γH2A的荧光强度变化.应用免疫沉淀实验验证XRCC5的泛素化修饰及其与SYVN1的相互作用.结果 Western blot实验结果表明,与对照组比较,OV-SYVN1组中SYVN1蛋白相对表达量明显上调(P＜0.01);与对照组比较,UVB组中γH2A蛋白相对表达量明显升高(P＜0.000 1);与UVB+HA组比较,UVB+OV-SYVN1组中γH2A蛋白相对表达量明显升高(P＜0.01).免疫荧光染色结果表明,与UVB+HA组比较,UVB+OV-SYVN1组中γH2A染色明显加强.UbiBrowser软件预测发现,SYVN1可能是XRCC5潜在的E3泛素连接酶;免疫沉淀实验结果显示,SYVN1和XRCC5存在相互作用,促进XRCC5蛋白发生泛素化修饰.Western blot实验结果显示,与对照组比较,OV-SYVN1组中XRCC5蛋白相对表达量明显下降(P＜0.001).结论 SYVN1可能介导DNA氧化损伤修复蛋白XRCC5产生泛素化修饰,并通过降解XRCC5蛋白表达参与DN

作者：王从玉；李鹏飞；王思文；鲍思洁；石海红；管怀进

来源：眼科新进展 2023 年 43卷 10期