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目的 探究Nei核酸内切酶Ⅷ样蛋白1(NEIL1)对过氧化氢(H2O2)诱导的晶状体上皮细胞(LECs)凋亡与自噬的影响.方法 以年龄相关性白内障(ARC)患者、接受透明晶状体摘除术的黄斑前膜患者的晶状体前囊膜样本和晶状体上皮细胞系SRA01/04细胞为研究对象,采用RT-PCR实验检测NEIL1 mRNA表达.将SRA01/04细胞随机分为对照组、OE-Vector组和OE-NEIL1组,采用RT-PCR和 Western blot检测过表达效率;将细胞随机分为对照组、H2O2组、OE-Vector H2O2组、OE-NEIL1 H2O2组,采用CCK-8法检测细胞活力,Western blot检测自噬相关蛋白(ATG7、P62、Beclin1、LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ)和凋亡相关蛋白(Bax和Bcl-2)的表达,荧光染色检测细胞凋亡与线粒体膜电位情况.结果 ARC患者晶状体前囊膜样本中的NEIL1 mRNA表达显著低于黄斑前膜患者,且H2O2组SRA01/04细胞中NEIL1 mRNA的表达同样低于对照组(均为P<0.05).RT-PCR与Western blot检测结果显示,OE-NEIL1组SRA01/04细胞中NEIL1 mRNA和蛋白表达均显著高于OE-Vec-tor组(均为P=0.000).与对照组相比,H2O2组SRA01/04细胞中细胞活力显著降低;Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调;Mito-Tracker标记活细胞数显著减少,Annexin V-FITC标记的凋亡细胞数显著增多,差异均有统计学意义(均为P<0.05).与OE-Vector H2O

作者:鲍思洁;李鹏飞;康丽华;王从玉;王思文;管怀进

来源:眼科新进展 2023 年 43卷 12期

知识库介绍

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作者:
鲍思洁;李鹏飞;康丽华;王从玉;王思文;管怀进
来源:
眼科新进展 2023 年 43卷 12期
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Nei核酸内切酶Ⅷ样蛋白1 年龄相关性白内障 晶状体上皮细胞 凋亡 自噬 Nei endonuclease Ⅷ-like protein 1 age-related cataract lens epithelial cells apoptosis autophagy
目的 探究Nei核酸内切酶Ⅷ样蛋白1(NEIL1)对过氧化氢(H2O2)诱导的晶状体上皮细胞(LECs)凋亡与自噬的影响.方法 以年龄相关性白内障(ARC)患者、接受透明晶状体摘除术的黄斑前膜患者的晶状体前囊膜样本和晶状体上皮细胞系SRA01/04细胞为研究对象,采用RT-PCR实验检测NEIL1 mRNA表达.将SRA01/04细胞随机分为对照组、OE-Vector组和OE-NEIL1组,采用RT-PCR和 Western blot检测过表达效率;将细胞随机分为对照组、H2O2组、OE-Vector H2O2组、OE-NEIL1 H2O2组,采用CCK-8法检测细胞活力,Western blot检测自噬相关蛋白(ATG7、P62、Beclin1、LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ)和凋亡相关蛋白(Bax和Bcl-2)的表达,荧光染色检测细胞凋亡与线粒体膜电位情况.结果 ARC患者晶状体前囊膜样本中的NEIL1 mRNA表达显著低于黄斑前膜患者,且H2O2组SRA01/04细胞中NEIL1 mRNA的表达同样低于对照组(均为P<0.05).RT-PCR与Western blot检测结果显示,OE-NEIL1组SRA01/04细胞中NEIL1 mRNA和蛋白表达均显著高于OE-Vec-tor组(均为P=0.000).与对照组相比,H2O2组SRA01/04细胞中细胞活力显著降低;Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调;Mito-Tracker标记活细胞数显著减少,Annexin V-FITC标记的凋亡细胞数显著增多,差异均有统计学意义(均为P<0.05).与OE-Vector H2O

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