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目的 观察磷脂酶C(PLC)抑制剂U73122和腺苷酸环化酶(AC)抑制剂SQ22536对豚鼠视网膜色素上皮(RPE)细胞增生及分泌转化生长因子-β2(TGF-β2)的影响.方法 胰蛋白酶消化法培养原代豚鼠RPE细胞,角蛋白免疫组织化学染色鉴定为阳性后,传2代细胞用于实验.实验组加入含不同浓度U73122或SQ22536的培养液,设溶剂对照.24 h后观察RPE细胞形态,噻唑蓝(MTT)法检测加入不同浓度U73122后RPE细胞的增生情况.酶联免疫吸附实验(ELISA)检测1×10-5 mol/L U73122及SQ22536作用2、4、6、8、16 h后细胞培养液中TGF-β2的分泌量.结果 培养的RPE细胞通过角蛋白染色后呈棕黄色阳性反应.MTT法检测显示,U73122实验组中除5×10-6 mol/L浓度组外,其余各浓度组OD值与对照组比较均显著下降,且随着浓度的增加,OD值下降越明显(P<0.05);SQ22536各浓度组与对照组OD值相比差异均无统计学意义(F=1.316,P>0.05).ELISA结果显示,加入1×10-5 mol/L U73122后2h实验组TGF-β2的分泌量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),4、6、8、16h后,实验组较对照组及2 h组均明显增加(P<0.05);而SQ22536组RPE细胞TGF-β2的分泌量在2、4、6、16h比较差异无统计学意义(P>0.05),8h时分泌量降低.结论 PLC抑制剂U73122能抑制RPE细胞的增生,并可使RPE细胞分泌TG

作者:张未娟;赵少贞;邓志宏

来源:眼科研究 2010 年 28卷 6期

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作者:
张未娟;赵少贞;邓志宏
来源:
眼科研究 2010 年 28卷 6期
标签:
视网膜色素上皮细胞 转化生长因子-β2 磷脂酶抑制剂 腺苷酸环化酶抑制剂
目的 观察磷脂酶C(PLC)抑制剂U73122和腺苷酸环化酶(AC)抑制剂SQ22536对豚鼠视网膜色素上皮(RPE)细胞增生及分泌转化生长因子-β2(TGF-β2)的影响.方法 胰蛋白酶消化法培养原代豚鼠RPE细胞,角蛋白免疫组织化学染色鉴定为阳性后,传2代细胞用于实验.实验组加入含不同浓度U73122或SQ22536的培养液,设溶剂对照.24 h后观察RPE细胞形态,噻唑蓝(MTT)法检测加入不同浓度U73122后RPE细胞的增生情况.酶联免疫吸附实验(ELISA)检测1×10-5 mol/L U73122及SQ22536作用2、4、6、8、16 h后细胞培养液中TGF-β2的分泌量.结果 培养的RPE细胞通过角蛋白染色后呈棕黄色阳性反应.MTT法检测显示,U73122实验组中除5×10-6 mol/L浓度组外,其余各浓度组OD值与对照组比较均显著下降,且随着浓度的增加,OD值下降越明显(P<0.05);SQ22536各浓度组与对照组OD值相比差异均无统计学意义(F=1.316,P>0.05).ELISA结果显示,加入1×10-5 mol/L U73122后2h实验组TGF-β2的分泌量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),4、6、8、16h后,实验组较对照组及2 h组均明显增加(P<0.05);而SQ22536组RPE细胞TGF-β2的分泌量在2、4、6、16h比较差异无统计学意义(P>0.05),8h时分泌量降低.结论 PLC抑制剂U73122能抑制RPE细胞的增生,并可使RPE细胞分泌TG

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