背景 氧化损伤是引起内皮细胞功能障碍和细胞死亡的重要因素之一,它还可导致视网膜血管性疾病的发生.复方血栓通对多种视网膜血管性疾病有一定的疗效,但分子机制尚不明确.目的 研究复方血栓通对叔丁基过氧化氢(t-BHP)诱导的人视网膜血管内皮细胞(RVECs)氧化损伤的保护作用及其机制.方法 分离健康人供体眼的视网膜,用组织块培养法进行人RVECs的原代培养,并用FITC-vWF染色流式细胞仪对培养细胞进行鉴定.取3～5代的细胞用于实验,在含有5×104个/L细胞密度的培养孔中分别加入质量浓度为0.0625、0.1250、0.2500、0.5000、1.000 g/L复方血栓通溶液,各质量浓度复方血栓通组和t-BHP模型组均加入终浓度为100μmol/L t-BHP,干预24 h后用MTT法检测各组人RVECs的吸光度(A490)值以评估复方血栓通的细胞毒性.t-BHP模型组分别加入终浓度为75、100、200和300 μmol/L的t-BHP,相应的复方血栓通组在不同浓度t-BHP造成细胞氧化损伤的同时均加入终质量浓度为0.2500 g/L复方血栓通溶液,干预6h后,用MTT法检测复方血栓通对t-BHP引起氧化损伤的作用.用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪检测各组细胞的凋亡和坏死率；用倒置显微镜和Hoechst33258细胞核染色观察各组细胞的形态学,利用免疫荧光法检测人RVECs中蛋白氧化损伤和DNA氧化损
作者：陈晓云；李建桥；朱晓波；肖伟；黄娟；李涛；唐仕波；罗燕
来源：中华实验眼科杂志 2011 年 29卷 10期
