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背景 人LECs表达端粒酶活性,其活性改变与白内障的形成相关.研究证实,雌激素能增加入子宫内膜癌及乳腺癌细胞的端粒酶活性,从而发挥促进增生、抗凋亡作用,但能否增加入LECs中的端粒酶活性从而影响其生物学功能,国内外鲜见报道. 目的 探讨β型雌二醇(β-E2)是否能增加入LECs端粒酶活性及其对人LECs增生和凋亡的影响.方法 体外培养并传代人LECs细胞系,先用1×10-6 mol/Lβ-E2分别作用人LECs 0、6、12、24和48 h,采用RT-PCR法确定增加人LECs中端粒酶逆转录酶(hTERT) mRNA表达的最佳时间.将培养的人LECs细胞分为5个组,空白对照组细胞进行常规培养,溶剂对照组在培养液中添加体积分数0.1%乙醇,不同浓度β-E2组分别在培养液中添加1×10-8、1×10-7和1×10-6 mol/Lβ-E2,继续培养细胞24 h,采用RT-PCR法检测各组人LECs中hHERT mRNA的相对表达量;采用端粒重复序列扩增(TRAP)-ELISA法检测端粒酶活性;采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测各组细胞的增生值;采用Hoechst33258荧光染色法分析人LECs的凋亡情况. 结果 1×10-6 mol/L β-E2浓度下能够增加人LECs中hTERT mRNA相对表达量的最佳作用时间为24 h.1×10-8、1×10-7和1×10-6 mol/Lβ-E2组人LECs中hTERT mRNA的相对表达量分别为0.477±0.015、0.712±0.013和0.914

作者:王杰;康刚劲;袁雪峰;徐曼华;蒋燕;罗波

来源:中华实验眼科杂志 2016 年 34卷 3期

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作者:
王杰;康刚劲;袁雪峰;徐曼华;蒋燕;罗波
来源:
中华实验眼科杂志 2016 年 34卷 3期
标签:
晶状体上皮细胞 雌二醇 端粒酶 年龄相关性,白内障 凋亡 增生 细胞培养 细胞系 Epithelial cells,lens Estradiol Telomerase Cataract,age-related Apoptosis Proliferation Cell,cultured Cell line
背景 人LECs表达端粒酶活性,其活性改变与白内障的形成相关.研究证实,雌激素能增加入子宫内膜癌及乳腺癌细胞的端粒酶活性,从而发挥促进增生、抗凋亡作用,但能否增加入LECs中的端粒酶活性从而影响其生物学功能,国内外鲜见报道. 目的 探讨β型雌二醇(β-E2)是否能增加入LECs端粒酶活性及其对人LECs增生和凋亡的影响.方法 体外培养并传代人LECs细胞系,先用1×10-6 mol/Lβ-E2分别作用人LECs 0、6、12、24和48 h,采用RT-PCR法确定增加人LECs中端粒酶逆转录酶(hTERT) mRNA表达的最佳时间.将培养的人LECs细胞分为5个组,空白对照组细胞进行常规培养,溶剂对照组在培养液中添加体积分数0.1%乙醇,不同浓度β-E2组分别在培养液中添加1×10-8、1×10-7和1×10-6 mol/Lβ-E2,继续培养细胞24 h,采用RT-PCR法检测各组人LECs中hHERT mRNA的相对表达量;采用端粒重复序列扩增(TRAP)-ELISA法检测端粒酶活性;采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测各组细胞的增生值;采用Hoechst33258荧光染色法分析人LECs的凋亡情况. 结果 1×10-6 mol/L β-E2浓度下能够增加人LECs中hTERT mRNA相对表达量的最佳作用时间为24 h.1×10-8、1×10-7和1×10-6 mol/Lβ-E2组人LECs中hTERT mRNA的相对表达量分别为0.477±0.015、0.712±0.013和0.914

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