目的 利用特异性siRNA沉默人胰腺癌AsPC-1细胞的膜型金属蛋白酶2(MT2-MMP)基因表达,观察其对缺氧条件下培养的细胞增殖、凋亡和侵袭力的影响.方法 采用脂质体转染法将插入MT2-MMP特异性siRNA的真核表达质粒转染至人胰腺癌AsPC-1细胞株(siRNA组),以转染过表达MT2-MMP质粒(过表达组)或阴性对照质粒(空载体组)的AsPC-1作为对照.实时定量PCR法和蛋白质印迹法检测转染细胞的MT2-MMP mRNA和蛋白的表达.在缺氧条件(37℃、1％O2、5％ CO2、饱和湿度的三气培养箱)下培养后,应用CCK-8法检测转染细胞的增殖,流式细胞仪检测细胞的凋亡,Transwells小室检测细胞的侵袭能力.结果 成功获取MT2-MMP基因沉默的AsPC-1细胞株和过表达的细胞株.缺氧条件下培养24h后,空载体组、过表达组、siRNA组细胞增殖的吸光度值(A490值)分别为0.68±0.08、0.80 ±0.08、0.52±0.07;细胞凋亡率分别为(6.2±1.5)％、(2.8±1.1)％、(21.4±3.9)％;每个视野(200倍)的穿膜细胞数分别为(115.8 ±23.2)、(256.4±38.6)、(45.8±18.2)个.siRNA组较空载体组的细胞增殖显著被抑制,穿膜细胞数显著减少,而细胞凋亡率显著增加(P值均＜0.05).过表达组较空载体组的细胞增殖显著增强,穿膜细胞数显著增加,而细胞凋亡率显著降低(P值均＜0.05).结论 MT2-MMP基因

作者：朱世凯；周玉；范平；王博；吴汉青；杨洪吉；熊炯炘；吴河水

来源：中华胰腺病杂志 2013 年 13卷 6期