目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)与胰岛细胞共培养体系下分化为胰岛样细胞团的可能性。方法:无菌条件下从Wistar大鼠的股骨及胫骨分离纯化BMSCs，流式细胞仪检测BMSCs表面标志物CD
44和CD
90表达；行成骨方向及成脂肪方向诱导分化，采用茜素红染色和油红O染色对诱导后的细胞进行鉴定。分离纯化大鼠胰腺的胰岛细胞，采用双硫腙染色鉴定。使用ELISA法检测胰岛细胞培养液的基础胰岛素水平；分别加入含葡萄糖5.6 mmol/L(低糖)和25.0 mmol/L(高糖)的培养液，ELISA法检测胰岛素释放量。取第5代BMSCs和胰岛细胞，随机分为干细胞单独培养组(干细胞组)、干细胞-胰岛细胞共培养组(共培养组)及胰岛细胞单独培养组(胰岛组)，使用倒置相差显微镜观察各组BMSCs的形态学变化；使用ELISA法检测各组基础胰岛素分泌量及高、低葡萄糖刺激后胰岛素释放量；免疫细胞化学染色法检测共培养组诱导形成的胰岛样细胞团的胰岛素蛋白表达；透射电镜观察胰岛样细胞超微结构。
结果:BMSCs表面标志物CD
44和CD
90的阳性率分别为99.48
作者：刘鑫；岑妍慧；贾微；杨瑞；李森；姜娜；黄泽萍；宁志莹；黄威
来源：中华胰腺病杂志 2022 年 22卷 6期
