目的 研究人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染ARPE-19细胞后对其细胞周期的影响,观察这种变化与HCMV IE2基因的关系,探讨HCMV感染的发病机制. 方法 用HCMV感染同步化的ARPE-19作为感染组,同时设模拟感染组为对照组.于感染后第1、2、3、4、5天收获细胞,RT-PCR方法 检测HCMV IE mRNA的表达水平,用免疫荧光法检测细胞核内HCMV IE蛋白的表达,Western blot法检测HCMV早期蛋白IE和晚期蛋白pp65的表达.采用PCR方法 从质粒pIEP86AD169扩增出IE2片段,构建真核表达质粒pEGFP-N3-IE2,脂质体介导瞬时转染ARPE-19细胞,RT-PCR、免疫荧光法分析IE2基因的表达.流式细胞术检测细胞周期的变化. 结果 HCMV IE72、IE86和pp65可分别在病毒感染ARPE-19细胞后第2、3和5天时检测到表达,流式细胞术示感染组在感染第3、4、5天细胞周期的S期细胞比例显著增高,与对照组比较差异均有显著性统计学意义,P﹤0.05.瞬时转染质粒pEGFP-N3-IE2后细胞周期表现为S期细胞比例显著增高. 结论 ARPE-19是HCMV的允许细胞,HCMV可引起ARPE-19细胞周期的改变,这种变化与IE2基因的表达有一定的关系.
作者：刘海燕；王斌；李玲；白志强；姜光域；王海涛；钱冬萌；赵巍；闫志勇；丁守怡；宋旭霞
来源：医学研究生学报 2010 年 23卷 5期
