目的：有研究表明硫化氢（hydrogen sulfide， H2S）能减少缺血再灌注损伤心肌细胞的凋亡，但确切机制不清。文中旨在研究心肌细胞缺氧／复氧（ hypoxia／reoxygenation ， HR）损伤中，H2 S能否通过调节miR-455的表达和减少内质网应激（ endoplasmic reticulum stress ， ERS）介导细胞凋亡发挥心肌保护作用。方法原代培养新生SD大鼠心肌细胞，建立心肌细胞HR模型。实验分组：对照组（心肌细胞正常培养27 h）；HR 组（将心肌细胞更换不含血清的DMEM液后进行HR处理）；H 2S 保护组[心肌细胞缺氧前30 min 给予40μmol／L的NaHS（ H2 S前体）预处理，其余处理同HR组]。采用MTT法检测细胞活力，全自动化学分析法检测培养液LDH漏出量，流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率，RT-PCR法、蛋白印记法分别检测miR-455及ERS介导细胞凋亡信号通路的标志物葡萄糖调节蛋白78（glucose regulated protein 78， Grp78）和caspase-12的mRNA、蛋白的表达。为检测miR-455是否参与H2 S抑制ERS介导的细胞凋亡，将心肌细胞又分为3组，阴性对照组（转染miR-455阴性对照片段24 h）；miR-455模拟剂组（转染miR-455模拟剂24 h），miR-455拮抗剂组（转染miR-455拮抗剂24 h），分别给予40μmol／L的NaHS预处理，再进行HR处理，检测Grp78、c

作者：康波；刘红明；洪江；朱晓燕；薛乾；肖健；张宇峰；杨潜；倪鑫；王志农

来源：医学研究生学报 2014 年 12期