目的 蛋白质精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)可通过表观遗传或翻译后甲基化修饰的方式参与众多的生物学调控.文中旨在探讨PRMT5对卵巢癌HO8910细胞增殖能力的影响. 方法 利用瞬时转染的方法获得PRMT5过表达的HO8910细胞株,分为空白对照组(野生型HO8910细胞株)、阴性对照组(转染pCMV-myc质粒的HO8910细胞)、实验组(转染pCMV-myc-PRMT5质粒的HO8910细胞). Western blot检测3组细胞标签蛋白myc的表达,qRT-PCR检测3组细胞PRMT5 mRNA的表达.另利用shRNA干扰方法建立诱导型稳定敲低PRMT5基因的HO8910细胞株,分为pLKO对照组(感染空载体慢病毒)、pLKO+Dox(100 ng/mL)组、shPRMT5组(感染PRMT5-shRNA慢病毒组)和shPRMT5+Dox(100 ng/mL)组.用不同浓度梯度的Dox诱导敲低(Dox 0 ng/mL、1 ng/mL、10 ng/mL、100 ng/mL)48 h,Western blot、qRT-PCR检测PRMT5的蛋白和mRNA的表达.克隆形成实验、EdU实验、CCK-8实验检测细胞增殖能力;实验细胞分为Dox-组、Dox+组、pCMV-myc组、pCMV-myc-PRMT5组. Western blot检测细胞PRMT5的表达对增殖相关蛋白的影响. 结果 Western blot结果显示,空白对照组和阴性对照组均无标签蛋白myc的表达,而实验组检测到myc的表达,qRT-PCR检测实验组PRMT5 mRNA表达远高于空白对照组和阴性对照组(P<0.01).与p
作者:魏野;王冉冉;韩田田;赵康荣;林琼;邵根宝
来源:医学研究生学报 2018 年 31卷 6期