目的 探讨白藜芦醇对LPS刺激下体外破骨细胞形成的作用途径和作用机制.方法 小鼠RAW264.7巨噬细胞分3组培养,即空白组(Sham组)、LPS组[空白组+LPS(1μg/ml)]和Res组[LPS组+白藜芦醇(10μmol/L)].抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法检测各组成熟破骨细胞数量,酶联免疫吸附试实验(ELISA)法检测各组上清液中TNF-α和IL-1β的含量,荧光定量聚合酶反应法(Q-PCR)检测各组中TNF-α和IL-1βmRNA的表达,Western blot法检测各组核转录因子 κBp65(NF-κBp65)与IκBα中磷酸化蛋白的水平.结果 TRAP染色:Res组TRAP染色阳性的破骨细胞数目相比LPS组明显减少;ELISA检测:LPS组中各炎性细胞因子表达水平较Sham组显著升高(P<0.05),Res组较LPS组各炎性细胞因子表达显著降低(P<0.05);Q-PCR检测:LPS组TNF-α和IL-1βmRNA的表达水平较Sham组明显升高(P<0.05),Res组中TNF-α、IL-1β的基因表达明显被抑制(P<0.05);Western blot法检测结果显示,Res组IκBα和p65的磷酸化水平相对于LPS组显著降低(P<0.05).结论 白藜芦醇可以通过NF-κB信号通路下调LPS刺激下小鼠RAW 264.7巨噬细胞中TNF-α与IL-1β的表达,进而影响破骨细胞的形成,有望作为治疗无菌性松动引起的炎性骨溶解的关键靶点.
作者:刘子歌;张晨;宋国瑞;李燕;刘心蕊;陈德胜
来源:医学研究杂志 2020 年 9期