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目的 探讨miR-155对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨分化能力的影响.方法 从C57/BL6J小鼠骨髓中分离BMSCs,BMSCs按照2×105个/mL的浓度接种,过夜贴壁后进行转染,通过miR-155模拟剂及miR-155抑制剂改变miR-155在BMSCs中的表达,同时设立miRNA模拟剂的同型对照和miRNA抑制剂的同型对照.采用qRT-PCR检测不同处理后BMSCs中骨标志基因RUNX2、骨钙蛋白(OCN)、骨桥蛋白和Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)的表达;通过碱性磷酸酶(ALP)染色和ALP活性分析观察ALP的表达和酶活性;通过茜素红染色检测细胞外钙盐结节的形成.结果 地塞米松使miR-155在BMSCs中的表达上调(13.56±0.45)倍(P<0.01),miR-155在BMSCs向成骨细胞诱导第4天时表达显著下调(P<0.01).转染miR-155模拟剂的BMSCs成骨诱导第12天时RUNX2、OCN和Col-Ⅰ的表达明显低于其同型对照(P<0.01),ALP活性明显低于其同型对照(P<0.01),ALP染色和茜素红染色的阳性细胞数也明显少于其同型对照.转染miR-155抑制剂的BMSCs成骨诱导第12天时RUNX2、OCN和Col-Ⅰ的表达明显高于其同型对照(P< 0.05或P<0.01),ALP活性明显高于其同型对照,ALP染色和茜素红染色的阳性细胞数也明显多于其同型对照.结论 转染miR-155模拟剂能够明显抑制BMSCs向成骨细胞分化,转染miR-155抑制剂则能够明显促进BMSC

作者:杨晓庆;苏健

来源:中国医药导报 2015 年 12卷 33期

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作者:
杨晓庆;苏健
来源:
中国医药导报 2015 年 12卷 33期
标签:
地塞米松 骨髓间充质干细胞 成骨分化 miR-155 骨质疏松症 Dexamethasone Bone marrow mesenchymal stem cells Osteogenic differentiation miR-155 Osteoporosis
目的 探讨miR-155对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨分化能力的影响.方法 从C57/BL6J小鼠骨髓中分离BMSCs,BMSCs按照2×105个/mL的浓度接种,过夜贴壁后进行转染,通过miR-155模拟剂及miR-155抑制剂改变miR-155在BMSCs中的表达,同时设立miRNA模拟剂的同型对照和miRNA抑制剂的同型对照.采用qRT-PCR检测不同处理后BMSCs中骨标志基因RUNX2、骨钙蛋白(OCN)、骨桥蛋白和Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)的表达;通过碱性磷酸酶(ALP)染色和ALP活性分析观察ALP的表达和酶活性;通过茜素红染色检测细胞外钙盐结节的形成.结果 地塞米松使miR-155在BMSCs中的表达上调(13.56±0.45)倍(P<0.01),miR-155在BMSCs向成骨细胞诱导第4天时表达显著下调(P<0.01).转染miR-155模拟剂的BMSCs成骨诱导第12天时RUNX2、OCN和Col-Ⅰ的表达明显低于其同型对照(P<0.01),ALP活性明显低于其同型对照(P<0.01),ALP染色和茜素红染色的阳性细胞数也明显少于其同型对照.转染miR-155抑制剂的BMSCs成骨诱导第12天时RUNX2、OCN和Col-Ⅰ的表达明显高于其同型对照(P< 0.05或P<0.01),ALP活性明显高于其同型对照,ALP染色和茜素红染色的阳性细胞数也明显多于其同型对照.结论 转染miR-155模拟剂能够明显抑制BMSCs向成骨细胞分化,转染miR-155抑制剂则能够明显促进BMSC

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