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目的 制备结核分枝杆菌(Mtb)6 kD早期分泌靶抗原(ESAT-6)单克隆抗体(mAb)并分析其特异性.方法 用亲和层析法纯化目的蛋白ESAT-6,并用该蛋白免疫小鼠.分离免疫小鼠的脾细胞并与骨髓瘤细胞融合,筛选分泌mAb的杂交瘤细胞系.制备腹水并纯化mAb.酶联免疫吸附试验法分析mAb亚类和相对亲和力,蛋白印迹法检测其特异性.结果 制备了可分泌ESAT-6抗体的杂交瘤细胞系,获得了纯化的mAb.mAb亚型为IgG1,相对亲和力为3.9×10-5.该mnAb可特异性识别Mtb的ESAT-6.结论 制备抗ESAT-6的mAb为ESAT-6用于结核病诊断与防治制剂及其机制研究奠定了基础.

作者:宁唤唤;任瑞;康健;白鹭;路延之;谢燕玲;张芳琳;柏银兰

来源:中国医药导报 2023 年 20卷 5期

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作者:
宁唤唤;任瑞;康健;白鹭;路延之;谢燕玲;张芳琳;柏银兰
来源:
中国医药导报 2023 年 20卷 5期
标签:
结核分枝杆菌 分泌蛋白 6 kD早期分泌靶抗原 单克隆抗体
目的 制备结核分枝杆菌(Mtb)6 kD早期分泌靶抗原(ESAT-6)单克隆抗体(mAb)并分析其特异性.方法 用亲和层析法纯化目的蛋白ESAT-6,并用该蛋白免疫小鼠.分离免疫小鼠的脾细胞并与骨髓瘤细胞融合,筛选分泌mAb的杂交瘤细胞系.制备腹水并纯化mAb.酶联免疫吸附试验法分析mAb亚类和相对亲和力,蛋白印迹法检测其特异性.结果 制备了可分泌ESAT-6抗体的杂交瘤细胞系,获得了纯化的mAb.mAb亚型为IgG1,相对亲和力为3.9×10-5.该mnAb可特异性识别Mtb的ESAT-6.结论 制备抗ESAT-6的mAb为ESAT-6用于结核病诊断与防治制剂及其机制研究奠定了基础.

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