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目的：构建表达β-半乳糖苷酶(β-gal)的重组腺病毒，以期为再狭窄的基因治疗研究提供一个对照载 体和为腺病毒介导的基因转移的安全性、可行性、转染效率的研究提供一有用的工具。方法：采用基因重组方法构 建穿梭质粒pAd-β-gal,通过同源重组法制备出重组腺病毒Ad-β-gal,转染的293细胞用X-gal染色鉴定Ad-β -gal的正确与否。通过测定260 nm的紫外光吸收值估计病毒高度。原代大鼠血管平滑肌细胞采用组织块培养 法。Ad-β-gal以100 moi感染VSMCs并行X-gal染色，以观察β-gal在VSMCs中的表达情况。结果：成功构建了 pAd-β-gal穿梭质粒和Ad-β-gal重组腺病毒，转染的293细胞和VSMCs经X-gal染为蓝色，病毒浓度为9×l011 pfu/ml,以100 moi Ad-β-gal转染VSMCs,其转染效率接近l00
作者：王家宁；黄永章；王俊峰；王卫民；李瑞明；葛永贵；张群林
来源：郧阳医学院学报 2000 年 19卷 4期
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