目的:探究sirtuin 6 (SIRT6)对肝癌细胞增殖的影响.方法:RT-qPCR检测200例肝癌病人及50例健康人外周血中的SIRT6的mRNA表达水平,并将肝癌病人外周血SIRT6的mRNA表达水平与多个临床病理参数相结合进行统计学分析.Western blotting检测SIRT6在原代肝细胞、永生化肝细胞及肝癌细胞系中的蛋白表达水平.在肝癌细胞中利用shRNA干扰SIRT6基因的表达,并通过Western blotting验证沉默效率;MTS实验检测SIRT6基因沉默对肝癌细胞活力的影响.EdU标记实验检测SIRT6基因沉默对肝癌细胞DNA合成的影响;平板集落实验检测SIRT6基因沉默对肝癌细胞集落形成能力的影响;软琼脂集落形成实验检测SIRT6基因沉默对肝癌细胞锚定非依赖生长能力的影响.结果:SIRT6在肝癌病人的外周血中表达明显增高,且SIRT6的表达量增高与肿瘤的大小、肿瘤的分级以及肿瘤的血管侵袭相关.进一步验证发现SIRT6在肝癌细胞系中表达水平较原代肝细胞PHH及永生化肝细胞MIHA增高.在2个肝癌细胞系中沉默SIRT6可以抑制肝癌细胞的活力及DNA合成能力,也可抑制肝癌细胞集落形成能力及锚定非依赖生长能力.结论:SIRT6促进肝癌细胞的增殖及恶性转化.
作者：陶娜娜；周洪钟；任吉华；陈祥；李宛蔚；刘波；陈娟
来源：中国病理生理杂志 2016 年 32卷 6期
