目的:探讨程序性死亡因子配体1免疫球蛋白( PDL1 Ig)基因转染骨髓间充质干细胞( BMSCs)抑制大鼠原位肝移植免疫排斥反应的机制。方法:培养并鉴定大鼠的BMSCs,重组腺病毒pAdEasy-1/PDL1 Ig感染BMSCs 72 h后,提取细胞总蛋白,采用Western blot法检测转染后BMSCs中PDL1 Ig的蛋白表达。混合淋巴细胞反应检测未转染和转染后的BMSCs对外周血T淋巴细胞活力的抑制作用。以雄性Wistar大鼠为供体,以雄性SD大鼠为受体,采用改良的两袖套法进行原位肝移植,建立大鼠原位肝移植急性排斥反应模型。随机分为对照组、BMSCs治疗组、空载体BMSCs治疗组( BMSCs/GFP)和转基因治疗组( BMSCs/PDL1 Ig),每组10对。每组随机取5只于术后第7天处死,检测外周血白细胞介素( IL)-2、IL-4和干扰素γ( IFN-γ)水平,检测肝功能情况,光学显微镜下观察移植肝的病理学变化,另外5只观察生存情况及时间。结果:重组pAdEasy-1/PDL1 Ig感染BMSCs 72 h后, BMSCs中有PDL1 Ig的蛋白表达。 BMSCs/PDL1 Ig抑制淋巴细胞活力的作用强于BMSCs/GFP。 BMSCs/PDL1 Ig组的IL-4水平明显高于其它3组,IL-2和IFN-γ水平也明显降低( P<0.05)。各实验组移植后7 d检测肝功能,发现BMSCs/PDL1 Ig组的肝功能改善最明显,A
作者:李鹏;李恒平;周东;丁正华;黄卫东;王俊;张玉毅
来源:中国病理生理杂志 2016 年 32卷 7期