目的：研究miR-496过表达对结肠癌细胞生长和转移的影响及其分子机制。方法：运用生物信息学软件筛选miR-496靶向相互作用蛋白；real-time PCR和Western blot 法测定结肠癌细胞系HT29、HCT116、SW480以及正常结肠上皮细胞NCM460中miR-496、CTNNB1 mRNA和β-catenin蛋白的表达；运用Lipofectamine 2000将miR-496 mimics转染HT29、HCT116和SW480细胞，分别命名为HT29-miR-496 mimics、HCT116-miR-496 mimics和SW480-miR-496 mimics细胞，转染scramble为阴性对照；运用MTT法、乳酸脱氢酶（ LDH）试剂盒法、克隆形成实验和Transwell分别测定细胞活力、LDH漏出率、克隆形成能力和转移能力；萤光素酶报告基因实验测定miR-496启动子活性；Western blot法测定β-catenin、真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白1（4E-BP1）、p-4E-BP1、低密度脂蛋白受体相关蛋白6（LRP6）、p-LRP6、MMP-7、MMP-9、MMP-13以及TIMP-2的蛋白水平。结果：miR-496与β-catenin内源性相互作用；miR-496在HT29、HCT116和SW480细胞中低表达，而在NCM460高表达；β-catenin在HT29、HCT116和SW480细胞中高表达，而在NCM460低表达；培养24 h、48 h、72 h、96 h的HT29-miR-496 mimics、HCT116-miR-496 mimics和SW480-miR-496 mimics细胞活力、LDH漏

作者：周静怡；钟冰；刘丽；王娟

来源：中国病理生理杂志 2016 年 32卷 10期