目的：探讨SD大鼠冠状动脉平滑肌细胞（coronary artery smooth muscle cells，CASMCs）原代培养方法，并建立CASMCs内质网应激（endoplasmic reticulum stress，ERS）模型。方法：用组织块贴壁法培养CASMCs，光学显微镜观察细胞形态。免疫荧光技术检测CASMCs的标志分子α－SMA和SM－MHC的表达。采用Western blot检测ERS发生的标志物BiP和CHOP的蛋白表达水平。结果：冠状动脉组织块贴壁培养6 d后，细胞从组织块边缘爬出，呈长梭型，9～10 d细胞生长汇合后表现出平滑肌细胞典型的“峰－谷”状。免疫荧光技术鉴定结果显示，α－SMA和SM－MHC表达呈阳性。不同浓度（0．5、1和2μmol／L）的毒胡萝卜素（thapsigargin，TG）处理CASMCs 24 h后，Western blot结果显示，TG（1和2μmol／L）处理组的BiP和CHOP蛋白表达与对照组相比增加，差异具有统计学意义。与对照组相比较，1μmol／L TG处理CASMCs 24和48 h后BiP和CHOP蛋白表达显著性增加。结论：采用组织块贴壁法可以成功培养CASMCs。利用1μmol／L TG诱导24 h可建立CASMCs 的ERS模型。
作者：陈肖燕；邓春玉；邝素娟；杨慧；饶芳；单志新；林秋雄；姜立
来源：中国病理生理杂志 2017 年 33卷 1期
