目的 探讨RNA干扰骨肉瘤中抗增殖蛋白(prohibitin)基因的表达对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响和机制.方法 收集2013年6月至2014年8月行骨肉瘤穿刺和活检存档的骨肉瘤及相应瘤旁组织的蜡块标本共40例,提取骨肉瘤及相应瘤旁组织中的总RNA及总蛋白,应用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白印迹法(Western blot)分别检测prohibitin基因的mRNA和蛋白表达;阴性对照小于扰RNA(NC-siRNA)组和RNA干扰(prohibitin-siRNA)组转染MG63细胞,不经任何处理的细胞作为空白对照组;转染48 h后提取细胞中的蛋白,Western blot检测各组细胞中prohibitin的蛋白表达以及增殖细胞核抗原(PCNA)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Cleaved caspase-3)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝氨酸苏氨酸激酶(AKT)、磷酸化AKT (p-AKT)的蛋白表达;CCK8实验检测并计算细胞增殖率;采用Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡,流式细胞术测定细胞凋亡率.结果 患者骨肉瘤组织中prohibitin的mRNA和蛋白的相对表达量均显著高于瘤旁组织(P均＜0.01).与空白对照组及NC-siRNA组比较,在RNA干扰组转染prohibitin-siRNA后MG63细胞的prohibitin蛋白相对表达量显著降低(P均＜0.01);RNA干扰组细胞存活率及Ki67、PCNA、PI3K、p-AKT蛋白相对表达量显著降低(P

作者：李强；赵永生；陈修福；张承韶

来源：中国临床研究 2017 年 30卷 10期