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目的构建卵巢癌抗独特型单链抗体3D5ScFv 和鼠GM-CSF 融合蛋白(3D5mGM ),并对其活性进行鉴定.方法用DNA 重组技术,将3D5ScFv基因与鼠粒细胞集落刺激因子(mGM-CSF)基因融合,插入到pET30a(+)中,构建重组质粒pET30a-3D5mGM,转化大肠杆菌BL21 (DE3),IPTG诱导,以包涵体形式获高效表达,超声破碎细菌细胞获得包涵体,用8 mol/L尿素溶解包涵体后直接稀释复性,SDS-PAGE分析蛋白纯度,ELISA和细胞增殖实验测定融合蛋白的抗体和细胞因子活性.结果复性蛋白纯度达90

作者:昌晓红;崔恒;冯捷;李艺;付天云;叶雪;程洪艳;李小平;祝洪澜;成夜霞

来源:中国妇产科临床杂志 2004 年 5卷 5期

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作者:
昌晓红;崔恒;冯捷;李艺;付天云;叶雪;程洪艳;李小平;祝洪澜;成夜霞
来源:
中国妇产科临床杂志 2004 年 5卷 5期
标签:
卵巢癌 重组融合蛋白 抗独特型抗体 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子
目的构建卵巢癌抗独特型单链抗体3D5ScFv 和鼠GM-CSF 融合蛋白(3D5mGM ),并对其活性进行鉴定.方法用DNA 重组技术,将3D5ScFv基因与鼠粒细胞集落刺激因子(mGM-CSF)基因融合,插入到pET30a(+)中,构建重组质粒pET30a-3D5mGM,转化大肠杆菌BL21 (DE3),IPTG诱导,以包涵体形式获高效表达,超声破碎细菌细胞获得包涵体,用8 mol/L尿素溶解包涵体后直接稀释复性,SDS-PAGE分析蛋白纯度,ELISA和细胞增殖实验测定融合蛋白的抗体和细胞因子活性.结果复性蛋白纯度达90

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