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目的:为明确COX-2表达是否可以影响乳腺癌细胞上皮间质转化(EMT)变化,培养高表达的COX-2和EMT改变的乳腺癌MDA-MB-231细胞,用不同浓度的塞来昔布和小干扰RNA分别来抑制COX-2功能和表达,观测细胞EMT的变化和Snail的表达.方法:培养乳腺癌MDA-MB-231细胞,构建干扰COX-2 siRNA载体,将干扰载体转染MDA-MB-231细胞,应用免疫荧光染色检测E-Cadherin、viminten和COX-2的表达,RT-PCR检测Western Blot检测Snail、COX-2的表达.检测培养液PGE2的水平.结果:小干扰RNA与塞来昔布治疗组相比E-Cadherin表达增加明显,viminten、Snail表达降低更显著,小干扰RNA处理乳腺癌MDA-MB-231细胞72 h后与塞来昔布处理的相比获得更多的上皮特征和更少的间质结构的特征.COX-2 mRNA在60 μmol/L的塞来昔布处理组和RNAi处理组COX-2 mRNA的相对表达分别为0.97和0.22,塞来昔布不能抑制COX-2 mRNA表达.干扰组与塞来昔布组相比,细胞培养液中PGE2的浓度没有显著差异.结论:①COX-2的抑制可通过PGE2的下调调控乳腺癌EMT.②COX-2通过非 PGE2依赖途径调节Snail的表达进而调控EMT的发生.

作者:吕丽;李文通;杨灵;辛崇玲;牟英文

来源:中国妇幼保健 2013 年 28卷 28期

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作者:
吕丽;李文通;杨灵;辛崇玲;牟英文
来源:
中国妇幼保健 2013 年 28卷 28期
标签:
上皮间质转变 环氧化酶-2 Snail 塞来昔布 RNA干扰 乳腺癌 EMT COX-2 Snail Celecoxib RNAi Breast cancer
目的:为明确COX-2表达是否可以影响乳腺癌细胞上皮间质转化(EMT)变化,培养高表达的COX-2和EMT改变的乳腺癌MDA-MB-231细胞,用不同浓度的塞来昔布和小干扰RNA分别来抑制COX-2功能和表达,观测细胞EMT的变化和Snail的表达.方法:培养乳腺癌MDA-MB-231细胞,构建干扰COX-2 siRNA载体,将干扰载体转染MDA-MB-231细胞,应用免疫荧光染色检测E-Cadherin、viminten和COX-2的表达,RT-PCR检测Western Blot检测Snail、COX-2的表达.检测培养液PGE2的水平.结果:小干扰RNA与塞来昔布治疗组相比E-Cadherin表达增加明显,viminten、Snail表达降低更显著,小干扰RNA处理乳腺癌MDA-MB-231细胞72 h后与塞来昔布处理的相比获得更多的上皮特征和更少的间质结构的特征.COX-2 mRNA在60 μmol/L的塞来昔布处理组和RNAi处理组COX-2 mRNA的相对表达分别为0.97和0.22,塞来昔布不能抑制COX-2 mRNA表达.干扰组与塞来昔布组相比,细胞培养液中PGE2的浓度没有显著差异.结论:①COX-2的抑制可通过PGE2的下调调控乳腺癌EMT.②COX-2通过非 PGE2依赖途径调节Snail的表达进而调控EMT的发生.

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