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目的:探讨通过反义RNA技术下调Raptor基因的表达,研究宫颈癌细胞株C33a中Raptor下调后宫颈癌细胞增殖及对化疗药物的敏感性.方法:C33a细胞分3组,实验组和阴性对照组分别转染Raptor siRNA和阴性对照siRNA,空白对照组不做任何处理.通过荧光实时定量PCR和蛋白印记法分别检测C33a转染siRNA后Raptor在mRNA和蛋白水平的表达,CCK-8法检测各组细胞的增殖和对顺铂敏感性的变化,流式细胞仪检测各组及加入顺铂后的凋亡情况.结果:转染siRNA 72 h后,Raptor分别在mRNA水平及蛋白水平较阴性对照下调为82%及78% (P <0.05),转染72 h后CCK-8法测细胞增殖,A值由空白对照组1.828±0.059、阴性对照组1.723±0.044明显降低为Raptor siRNA组的1.349±0.040 (P <0.05),各组加入8μM顺铂后,Raptor siRNA组凋亡率为(40.14±1.57)%较空白对照组(21.76±1.23)%和阴性对照组(20.81±1.45)%明显增加(P<0.05).结论:Raptor siRNA能显著下调C33a细胞中Raptor在mRNA和蛋白水平的表达,抑制C33a细胞的增殖,增加对化疗药物顺铂的敏感性和促凋亡作用.

作者:秦宇;赵雪娇;王婷;朱涛

来源:中国妇幼保健 2014 年 29卷 9期

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作者:
秦宇;赵雪娇;王婷;朱涛
来源:
中国妇幼保健 2014 年 29卷 9期
标签:
宫颈癌 C33a细胞 Raptor RNA干扰 凋亡 Cervical cancer C33a cell Raptor RNA interference Apoptosis
目的:探讨通过反义RNA技术下调Raptor基因的表达,研究宫颈癌细胞株C33a中Raptor下调后宫颈癌细胞增殖及对化疗药物的敏感性.方法:C33a细胞分3组,实验组和阴性对照组分别转染Raptor siRNA和阴性对照siRNA,空白对照组不做任何处理.通过荧光实时定量PCR和蛋白印记法分别检测C33a转染siRNA后Raptor在mRNA和蛋白水平的表达,CCK-8法检测各组细胞的增殖和对顺铂敏感性的变化,流式细胞仪检测各组及加入顺铂后的凋亡情况.结果:转染siRNA 72 h后,Raptor分别在mRNA水平及蛋白水平较阴性对照下调为82%及78% (P <0.05),转染72 h后CCK-8法测细胞增殖,A值由空白对照组1.828±0.059、阴性对照组1.723±0.044明显降低为Raptor siRNA组的1.349±0.040 (P <0.05),各组加入8μM顺铂后,Raptor siRNA组凋亡率为(40.14±1.57)%较空白对照组(21.76±1.23)%和阴性对照组(20.81±1.45)%明显增加(P<0.05).结论:Raptor siRNA能显著下调C33a细胞中Raptor在mRNA和蛋白水平的表达,抑制C33a细胞的增殖,增加对化疗药物顺铂的敏感性和促凋亡作用.

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