目的:探究慢病毒介导BMP-2过表达质粒转染骨髓间充质干细胞联合丝素蛋白支架向成骨细胞转化的作用效果.方法:构建慢病毒BMP-2过表达载体,培养骨髓间充质干细胞,构建细胞核支架的联合培养体系,体外实验利用茜素红染色和碱性磷酸酶染色检测骨髓间充质干细胞的成骨转化.选择10只新西兰大白兔,体重3.2～4.5 kg,平均3.9 kg;年龄(2.89±0.45)岁;使用口腔钻在兔子胫骨钻孔(长度5 mm、宽度2mm、深度3 mm的锥形胫骨缺损)构建兔子胫骨骨缺损模型,HE染色观察动物模型内骨缺损的修复.实验组造模后植入丝素蛋白支架+转染BMP-2过表达载体骨髓间充质干细胞复合物,阴性对照组造模后植入丝素蛋白支架+未转染骨髓间充质干细胞复合物.结果:实验组(丝素蛋白支架+转染BMP-2过表达载体骨髓间充质干细胞复合物)中支架表面黏附的细胞与对照组(丝素蛋白支架+未转染骨髓间充质干细胞)相比,细胞数明显增多.实验组细胞外基质分泌与对照组相比,支架间细胞外基质含量明显增多.对照组支架表面元素EDX分析显示钙离子含量为0.22％,实验组支架表面元素EDX分析显示钙离子含量为0.86％,可见实验组诱导钙离子形成的能力要比对照组强.钙结节茜素红染色结果显示,对照组肉眼观无明显变化,镜下观察可见少量钙结节点.实验组肉眼观可见明显红色区域染
作者：范少鹏；李晓辉；时彩霞；范春霞；叶发刚
来源：中国骨伤 2019 年 32卷 9期
