目的：比较HCV不同基因型核心蛋白（core）在肝母细胞瘤细胞凋亡中的作用。方法构建6a基因型HCV core的表达载体pcDNA3.1/myc-His（-）-core（6a）[pCore（6a）]；分别将1b、3a和6a基因型HCV core质粒以及空质粒pcDNA3.1/myc-His（-）（pNC）瞬时转染HepG2细胞，48小时后利用流式细胞术检测细胞凋亡发生的情况；利用Real-time PCR检测胱冬肽酶-3的mRNA水平变化；利用化学发光法检测胱冬肽酶-3的活性变化，比较HCV不同基因型core对细胞凋亡作用的差异。结果成功构建了6a基因型HCV core的表达载体pcDNA3.1/myc-His（-）-core（6a）[pCore（6a）]；与pNC组相比，表达1b、3a和6a基因型HCV core的HepG2细胞中，Annexin V＋细胞数均显著减少，其中6a基因型core较1b和3a基因型core作用显著（P ＝0.000、0.001）；同时实验组中凋亡效应分子胱冬肽酶-3的mRNA水平及其活性较对照组均降低；其中与1b和3a基因型core相比较，6a基因型core显著降低胱冬肽酶-3的mRNA水平，而在抑制胱冬肽酶-3活性方面无显著差别。结论HCV不同基因型core对细胞凋亡的作用不同；基因6a型core对细胞凋亡的抑制作用更为显著；HCV基因6型核心蛋白可能更易导致肝癌的发生，有待进一步研究。
作者：冯胜虎；鞠威；全敏；杨松；刘顺爱；张锦前；王琦；梁金秋；纪世博；成军
来源：中国肝脏病杂志（电子版） 2014 年 1期
