目的建立用巢式聚合酶链反应(Nested PCR)- 限制片段长度多态性(Restriction fragment length polymorphism,RFLP)检测、鉴别微小隐孢子虫(Cryptospordium parvum)和安氏隐孢子虫(C. andersoni)的方法. 方法用巢式PCR技术扩增长春市人和牛粪便中C. parvum与C. andersoni的Small-Subunit rRNA (SSU rRNA)部分基因,并克隆和测序.扩增产物分别用SspⅠ和VspⅠ单酶切,进行RFLP分析,并与GenBank上的17株隐孢子虫相应序列进行对比分析和系统发育分析. 结果 C. parvum HCC1、C. parvum BOCC1和C. andersoni BOCC1扩增产物片段大小分别为830 bp、830 bp和828 bp,经SspⅠ和VspⅠ分别单酶切后形成2种不同的RFLP图谱,根据RFLP图谱可鉴别C. parvum与C. andersoni.序列分析结果显示,C. parvum HCC1与国外牛源C. parvum BOH6、C. parvum GCH1、鹿源C. parvum DR1相应序列同源性均为99.3
作者：姚龙泉；张西臣；Lihua Xiao；吴涛；李建华；尹继刚
来源：中国寄生虫病防治杂志 2004 年 17卷 6期
