目的 原核表达、分离纯化毛首鞭形线虫(Trichuris trichiura)丝氨酸蛋白酶抑制剂1(TtSerpin1),并观察其对蛋白酶的抑制作用. 方法 从毛首鞭形线虫成虫cDNA中扩增TtSerpin1编码序列(GenBank 登录号为MF401634),将其连接入原核表达载体,构建重组质粒pET3 2a-sumo/ TtSerpin1.将重组质粒转化入大肠埃希菌(Escherichia coli)BL21 (DE3)中,用异丙基-3-D-硫代半乳糖苷诱导TtSerpin1融合蛋白表达.表达的包涵体蛋白经变性、复性、镍亲和层析纯化、SUMO蛋白酶酶切融合标签后获得rTtSerpin1.用发色底物法检测其对人组织蛋白酶G、中性粒细胞弹性蛋白酶、蛋白酶3、纤溶酶和胰蛋白酶,猪胰蛋白酶、胰弹性蛋白酶及牛α-胰糜蛋白酶的抑制作用. 结果 成功构建了重组质粒p ET3 2a-sumo/ TtSerpin1,并在E.coli中成功表达.表达产物主要为包涵体,复性、纯化后的rTtSerpin1具有较好的蛋白酶抑制活性.1 000 nmol/L的rTtSerpin1对人组织蛋白酶G (100 nmol/L)、中性粒细胞弹性蛋白酶(10 nmol/L)、蛋白酶3(200 nmol/L),猪胰弹性蛋白酶(10 nmol/L),牛α-胰糜蛋白酶(1 nmol/L)的蛋白酶活性抑制率分别为60.89％、82.84％、21.21％、58.32％、96.98％,但对人纤溶酶、胰蛋白酶及猪胰蛋白酶抑制活性较弱.rTtSerpin1对人组织蛋白酶G及中性

作者：司徒永立；邵正；邓莉；隋细香；李海舰；许琴英；何庆丰；彭礼飞

来源：中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2017 年 35卷 4期