目的:探讨Paxillin对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向类髓核细胞分化的影响.方法:取3周龄健康SD大鼠骨髓,采用全骨髓贴壁法培养BMSCs,传至第3代,用流式细胞仪对其表面标志分子进行鉴定.利用pcDNA3.1(-)/Myc-His B质粒构建真核表达载体pcDNA3.1-Paxillin.取第3代BMSCs分为3组:实验组,转染pcDNA3.1-Paxillin;阴性对照组,转染pcDNA3.1(-)/Myc-His B;空白对照组,不转染质粒.分别培养36h后,实验组和阴性对照经G418筛选,取3组BMSCs采用实时荧光定量PCR方法(qRT-PCR)检测各组Paxillin、蛋白多糖(Aggreean)、Ⅱ型胶原α1 (collagen typeⅡα1,COL2α1)、性别决定区Y框蛋白9(sex determining region Y box protein 9,SOX9)、角蛋白19 (keratin 19,KRT19)、配对盒1(paired box 1,PAX1)和叉头蛋白(forkhead box F1,FOXF1)的mRNA表达量;免疫印迹法(Western blot)检测Paxillin、KRT19、PAX1和FOXF1蛋白表达水平.结果:BMSCs原代培养至第3代的细胞形态大体一致,呈长梭形,细胞连接紧密且均匀分布,CD44、CD90呈现高表达(95.6％和96.8％),CD45、CD11则呈现低表达(1.82％和2.16％).实验组中Paxillin的mRNA和蛋白表达量较阴性对照组和空白对照组升高,差异具有显著性(R0.05);经G418筛选后的BMSCs和髓核细胞形态相似.实验组中COL2α1

作者：刘汝银；岳宗进；彭晓艳；王新立；冯仲锴

来源：中国脊柱脊髓杂志 2016 年 26卷 5期