目的:使用蛋白质组学方法筛查大鼠背根神经节(DRG)持续受压(CCD)后差异表达的蛋白质,特别是筛查与疼痛和组织损伤相关的蛋白.方法:78只Wister大鼠随机分为正常组和CCD组,建立CCD模型后,测量行为学指标.28d后处死大鼠,从DRGs中提取蛋白,进行双向电泳分离蛋白,找出差异表达蛋白,使用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱分析得到其肽指纹图谱(PMF),进行鉴定.使用Western blot和实时RT-PCR验证部分差异蛋白.结果:CCD明显降低机械痛阈和热辐射刺激缩爪反应潜伏期.正常组和CCD组98个蛋白点的表达存在明显差异,成功鉴定出15种蛋白,其中8种蛋白的表达在CCD组下调,7种蛋白表达上调(其中1种蛋白只存在于CCD组).验证显示与质谱分析的结果相符.结论:以差异蛋白质组学的方法分析CCD对DRG蛋白质表达的影响,鉴定出15种差异表达的蛋白.其中膜联蛋白A2、p11和蛋白激酶Cε(PKCε)蛋白表达的上调,可能参与了神经性疼痛的发生过程.三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)的上调或许参与神经元凋亡,热休克蛋白70(HSP70)的表达上调或许与神经保护有关.
作者:张杨;张燕;王永慧;张旭华;邵建敏;岳寿伟
来源:中国康复医学杂志 2010 年 25卷 10期