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目的 分别以P2X7、外泌体以及瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)为作用靶点,研究青蒿素(ART)抑制星形胶质细胞炎症通路的分子机制.方法 培养小鼠原代星形胶质细胞,利用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光鉴定原代星形胶质细胞的纯度;MTT法检测ART对细胞活性的影响;脂多糖(LPS)处理原代星形胶质细胞,构建细胞炎症模型;分为空白对照组,ART组,外泌体抑制剂组,P2X7受体抑制剂组,TRPV1受体抑制剂组,TRPV1受体激动剂组,通过ELISA法和吸光光度法检测细胞上清液中炎症因子的含量(TNF-α、IL-1β、IL-6及NO).结果 GFAP阳性细胞数达95%表明成功分离培养小鼠原代星形胶质细胞:300 ng/mL的LPS处理12 h是刺激星形胶质细胞构建炎症模型的最佳浓度和时间:10 μmol/mL的ART处理12 h可以达到最佳的抗炎效果,并且当浓度小于20 μmol/mL时,对细胞活性基本无影响;抑制P2X7受体的表达和外泌体的释放均能降低细胞中炎症因子TNF-α的含量,但不能与ART产生协同降低的效果;抑制TRPV1受体增加了细胞中的TNF-α、IL-1β、IL-6以及NO表达,激活TRPV1受体可降低TNF-α、IL-1β、IL-6以及NO表达,并且ART与TRPV1受体激动剂合用时,能协同降低炎性因子表达.结论 青蒿素除了已知的通路发挥其抗炎作用之外,还有可能通过TRPV1通路发挥其抗炎作用.本

作者:张书滔;童宇;郭小岚;陈俊希;许光亚;唐勇;郑露露;时政

来源:中国抗生素杂志 2023 年 48卷 10期

知识库介绍

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作者:
张书滔;童宇;郭小岚;陈俊希;许光亚;唐勇;郑露露;时政
来源:
中国抗生素杂志 2023 年 48卷 10期
标签:
神经炎症 青蒿素 星形胶质细胞 P2X7 外泌体 TRPV1 Neuroinflammation Artemisinin Astrocytes P2X7 Exosomes TRPV1
目的 分别以P2X7、外泌体以及瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)为作用靶点,研究青蒿素(ART)抑制星形胶质细胞炎症通路的分子机制.方法 培养小鼠原代星形胶质细胞,利用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光鉴定原代星形胶质细胞的纯度;MTT法检测ART对细胞活性的影响;脂多糖(LPS)处理原代星形胶质细胞,构建细胞炎症模型;分为空白对照组,ART组,外泌体抑制剂组,P2X7受体抑制剂组,TRPV1受体抑制剂组,TRPV1受体激动剂组,通过ELISA法和吸光光度法检测细胞上清液中炎症因子的含量(TNF-α、IL-1β、IL-6及NO).结果 GFAP阳性细胞数达95%表明成功分离培养小鼠原代星形胶质细胞:300 ng/mL的LPS处理12 h是刺激星形胶质细胞构建炎症模型的最佳浓度和时间:10 μmol/mL的ART处理12 h可以达到最佳的抗炎效果,并且当浓度小于20 μmol/mL时,对细胞活性基本无影响;抑制P2X7受体的表达和外泌体的释放均能降低细胞中炎症因子TNF-α的含量,但不能与ART产生协同降低的效果;抑制TRPV1受体增加了细胞中的TNF-α、IL-1β、IL-6以及NO表达,激活TRPV1受体可降低TNF-α、IL-1β、IL-6以及NO表达,并且ART与TRPV1受体激动剂合用时,能协同降低炎性因子表达.结论 青蒿素除了已知的通路发挥其抗炎作用之外,还有可能通过TRPV1通路发挥其抗炎作用.本

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