目的：探究星形胶质细胞内PTEN诱导假定激酶1(PINK1)缺失对缺血时神经保护作用的影响及其作用机制。方法离体培养原代星形胶质细胞，使用小干扰RNA(siRNA)沉默PINK1表达，氧糖剥夺(OGD)建立细胞缺氧模型，分为4组：PINK1沉默组(siRNA+转染剂)、空质粒组(空质粒+转染剂)、转染剂组(只加转染剂)和对照组(星形胶质细胞)，各组均与神经元共培养；另设立神经元单独培养组。免疫荧光染色观察神经元凋亡情况。定量 PCR及ELISA检测星形胶质细胞促红细胞生成素(EPO)及血管内皮生长因子(VEGF)表达量；Western blot检测星形胶质细胞内缺血诱导因子(HIF)及核因子κB(NF-κB)通路相关蛋白水平。结果 OGD损伤后神经元凋亡率较高，与星形胶质细胞共培养后神经元凋亡率显著降低(P<0.05)。PINK1基因沉默后共培养神经元凋亡增加，星形胶质细胞EPO及VEGF分泌量减少、胞内EPO及VEGF转录水平降低(P<0.05)；HIF-1、HIF-2与NF-κB通路活化水平均显著降低(P<0.05)。结论星形胶质细胞对OGD损伤神经元有保护作用，其作用通过EPO及VEGF实现；PINK1基因沉默后星形胶质细胞对缺血神经元保护作用减弱，可能与NF-κB通路活化水平降低、HIF激活受损进而下调EPO和VEGF表达量有关。
作者：王寻；国敏；王卫峰；董强；崔梅
来源：中国临床神经科学 2016 年 24卷 6期
