目的：探讨体外条件下成骨诱导剂和血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor, VEGF)的联合应用对兔骨髓基质干细胞(Bone Marrow Stromal Cells,BMSCs)成骨分化过程中细胞增殖和分化的影响,为骨组织工程研究提供实验基础。方法取2月龄新西兰大耳白兔,麻醉后抽取股骨骨髓进行 BMSCs 原代细胞培养,取生长良好的第三代 BMSCs 进行分组培养。空白组：完全培养基培养；对照组：完全培养基中加入成骨诱导剂；实验组：完全培养基中加入成骨诱导剂及 VEGF(10ng/ml)。MTT 法检测诱导 BMSCs 成骨分化过程中细胞生长与增殖情况并绘制生长曲线；倒置相差显微镜、光学显微镜及扫描电镜观察诱导 BMSCs 成骨分化过程细胞的形态特征；茜素红(Alizarin Red S,ARS)染色鉴定钙结节；碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,ALP)染色、ALP 活性及 RT-PCR 检测 I 型胶原(Collagen typeⅠ,colⅠ)mRNA 表达；免疫组化染色检测诱导后细胞中 VEGF 蛋白表达情况。结果①诱导 BMSCs 向成骨细胞分化后细胞呈圆形或多边型,短柱状或立方形,细胞表面有短的突起与相邻细胞连接。②茜素红染色光学显微镜下可见实验组和对照组均有散在的红色团块即钙结节。③二组中 ALP 染色均可见细胞浆内有黑色的碱性磷酸酶颗粒,但实验组 ALP 染色阳
作者：庞海涛；刘伟；甘洪全；李立东；王志强；李琪佳
来源：中国煤炭工业医学杂志 2016 年 19卷 4期
