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目的:本实验以小鼠系膜细胞为研究对象,IFN-γ为刺激物,通过检测JAK/STAT信号途经的激活及HMGB1mRNA及蛋白表达,探讨γ干扰素刺激系膜细胞HMGB1表达上调的可能机制.方法:常规培养小鼠系膜细胞(Mouse mesangial cell,MMC),无血清培养基同步化后分为正常对照组、IFN-γ(500 U/ml)刺激组和INF-γ+AG490 ( INF-γ 500 U/ml+AG490 200 μmol/ml )组.Western blot检测JAK、STAT1和HMGB1蛋白的表达变化,RT-PCR检测HMGB1mRNA 的表达变化.结果:Western blot结果显示IFN-γ能够促进小鼠系膜细胞JAK、STAT1磷酸化和STAT1核转位,并呈时间依赖性; AG490能够降低IFN-γ介导的JAK1、JAK2、STAT1的活化,并呈时间依赖性.IFN-γ能够上调系膜细胞中HMGB1mRNA及蛋白表达,并随着刺激时间延长,其相对表达量呈上升趋势,AG490处理后,系膜细胞中HMGB1mRNA蛋白表达降低,并随时间延长而下调.结论:IFN-γ能够促进小鼠系膜细胞HMGB1表达上调,JAK/STAT信号通路激活可能是其主要机制之一.

作者:陈砚凝;张玉军;吕欣;刘青娟;刘淑霞

来源:中国免疫学杂志 2012 年 28卷 10期

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作者:
陈砚凝;张玉军;吕欣;刘青娟;刘淑霞
来源:
中国免疫学杂志 2012 年 28卷 10期
标签:
狼疮性肾炎 IFN-γ JAK/STAT HMGB1
目的:本实验以小鼠系膜细胞为研究对象,IFN-γ为刺激物,通过检测JAK/STAT信号途经的激活及HMGB1mRNA及蛋白表达,探讨γ干扰素刺激系膜细胞HMGB1表达上调的可能机制.方法:常规培养小鼠系膜细胞(Mouse mesangial cell,MMC),无血清培养基同步化后分为正常对照组、IFN-γ(500 U/ml)刺激组和INF-γ+AG490 ( INF-γ 500 U/ml+AG490 200 μmol/ml )组.Western blot检测JAK、STAT1和HMGB1蛋白的表达变化,RT-PCR检测HMGB1mRNA 的表达变化.结果:Western blot结果显示IFN-γ能够促进小鼠系膜细胞JAK、STAT1磷酸化和STAT1核转位,并呈时间依赖性; AG490能够降低IFN-γ介导的JAK1、JAK2、STAT1的活化,并呈时间依赖性.IFN-γ能够上调系膜细胞中HMGB1mRNA及蛋白表达,并随着刺激时间延长,其相对表达量呈上升趋势,AG490处理后,系膜细胞中HMGB1mRNA蛋白表达降低,并随时间延长而下调.结论:IFN-γ能够促进小鼠系膜细胞HMGB1表达上调,JAK/STAT信号通路激活可能是其主要机制之一.

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