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目的:探讨敲减泛素结合酶E2T(UBE2T)的表达对肺癌细胞A549生长、侵袭和裸鼠成瘤性的影响,初步阐明其作用机制.方法:靶向UBE2T基因的慢病毒载体(shRNA1、shRNA2、shRNA3)及阴性对照慢病毒载体(shRNA-NC)转染人非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞系,筛选干扰效果较好的shRNA3进行后续实验.CCK-8法、流式细胞术、Transwell小室法检测细胞的增殖、凋亡及侵袭能力,Western blot法检测相关蛋白表达.检测小鼠体内的成瘤质量,免疫组化法检测瘤体组织中Ki67、VEGF蛋白表达情况.结果:与shRNA-NC组相比,UBE2T-shRNA3组各时间点的细胞增殖率、穿膜细胞数及Ki67、VEGF、N-cad蛋白表达明显下降(P<0.05),细胞凋亡率、p21、cleaved cas3/cas3、cleaved cas9/cas9明显上升(P<0.05).体内实验结果显示,与shRNA-NC组相比,UBE2T-shRNA3组小鼠的瘤体质量及Ki67、VEGF蛋白阳性表达率明显下降(P<0.05).结论:敲减UBE2T的表达可抑制肺癌细胞A549的增殖、侵袭,促进细胞凋亡,抑制裸鼠成瘤.

作者:段方方;赵晓丽;侯小霞;王留晏;陈露;周寒丽;张玉洁;孔天东

来源:中国免疫学杂志 2022 年 38卷 20期

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作者:
段方方;赵晓丽;侯小霞;王留晏;陈露;周寒丽;张玉洁;孔天东
来源:
中国免疫学杂志 2022 年 38卷 20期
标签:
泛素结合酶E2T 人非小细胞肺癌A549细胞系 肺癌 增殖 凋亡 侵袭
目的:探讨敲减泛素结合酶E2T(UBE2T)的表达对肺癌细胞A549生长、侵袭和裸鼠成瘤性的影响,初步阐明其作用机制.方法:靶向UBE2T基因的慢病毒载体(shRNA1、shRNA2、shRNA3)及阴性对照慢病毒载体(shRNA-NC)转染人非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞系,筛选干扰效果较好的shRNA3进行后续实验.CCK-8法、流式细胞术、Transwell小室法检测细胞的增殖、凋亡及侵袭能力,Western blot法检测相关蛋白表达.检测小鼠体内的成瘤质量,免疫组化法检测瘤体组织中Ki67、VEGF蛋白表达情况.结果:与shRNA-NC组相比,UBE2T-shRNA3组各时间点的细胞增殖率、穿膜细胞数及Ki67、VEGF、N-cad蛋白表达明显下降(P<0.05),细胞凋亡率、p21、cleaved cas3/cas3、cleaved cas9/cas9明显上升(P<0.05).体内实验结果显示,与shRNA-NC组相比,UBE2T-shRNA3组小鼠的瘤体质量及Ki67、VEGF蛋白阳性表达率明显下降(P<0.05).结论:敲减UBE2T的表达可抑制肺癌细胞A549的增殖、侵袭,促进细胞凋亡,抑制裸鼠成瘤.

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