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目的:制备水痘-带状疱疹病毒(VZV)衣壳蛋白ORF41的单克隆抗体(mAbs),并对该蛋白性质进行初步研究.方法:截取VZV ORF41蛋白亲水性及免疫原性较优的片段,用大肠杆菌蛋白表达系统对相关区段进行表达并纯化,免疫BALB/c小鼠后,通过杂交瘤细胞技术制备并筛选出针对VZV ORF41的mAbs,并利用制备得到的mAbs进行ELISA、Western blot和免疫荧光实验,检测所得抗体的亲和性和特异性,同时分析VZV ORF41蛋白在细胞中的表达与分布特征.结果:本研究筛选到的VZV OR41 mAb 12C3具有较高的亲和性和特异性,可特异性识别在质粒转染及VZV感染细胞中表达的ORF41蛋白,且发现检测出的VZV ORF41蛋白在细胞质与细胞核中均有分布.结论:本研究获得针对VZV ORF41反应性、特异性良好的mAb,为进一步开展VZV ORF41蛋白功能和作用机制的研究提供基础.

作者:蔡雨泽;潘德全;杨睿曦;袁成先;赵灿阳;赵欢;程通;王玮;夏宁邵

来源:中国免疫学杂志 2023 年 39卷 5期

知识库介绍

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作者:
蔡雨泽;潘德全;杨睿曦;袁成先;赵灿阳;赵欢;程通;王玮;夏宁邵
来源:
中国免疫学杂志 2023 年 39卷 5期
标签:
水痘-带状疱疹病毒 衣壳蛋白 ORF41 单克隆抗体
目的:制备水痘-带状疱疹病毒(VZV)衣壳蛋白ORF41的单克隆抗体(mAbs),并对该蛋白性质进行初步研究.方法:截取VZV ORF41蛋白亲水性及免疫原性较优的片段,用大肠杆菌蛋白表达系统对相关区段进行表达并纯化,免疫BALB/c小鼠后,通过杂交瘤细胞技术制备并筛选出针对VZV ORF41的mAbs,并利用制备得到的mAbs进行ELISA、Western blot和免疫荧光实验,检测所得抗体的亲和性和特异性,同时分析VZV ORF41蛋白在细胞中的表达与分布特征.结果:本研究筛选到的VZV OR41 mAb 12C3具有较高的亲和性和特异性,可特异性识别在质粒转染及VZV感染细胞中表达的ORF41蛋白,且发现检测出的VZV ORF41蛋白在细胞质与细胞核中均有分布.结论:本研究获得针对VZV ORF41反应性、特异性良好的mAb,为进一步开展VZV ORF41蛋白功能和作用机制的研究提供基础.

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