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目的 构建人IFN-γ与GM-CSF融合基因的卡介苗(BCG)重组质粒,并在卡介苗中分泌表达人IFN-γ与GM-CSF蛋白.方法 采用反转录PCR,分别获得人IFN-γ与GM-CSF基因编码序列的cDNA.将IFN-γ与GM-CSF基因进行PCR扩增,通过接头(Gly4 Ser)3将其连接,形成融合基因,将融合基因插入到pMV261质粒HSP60启动子下游,构建一个分泌型的卡介苗-大肠杆菌穿梭表达质粒pMVGMI-γ.转化感受态细胞E.coli DH5α,在LB培养基平板上进行卡那霉素抗性选择,选择阳性克隆提取质粒后转化感受态BCG,用(NH4)2SO4沉淀、分子筛层析柱Bio-Gel P-6 DG纯化目的蛋白,10
作者：尹国才；李运清；杨媛媛；谭文彬；薛庆节；陈廷
来源：中国热带医学 2017 年 17卷 2期
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