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目的构建能表达结核分枝杆菌早期分泌蛋白CFP10-ESAT6融合蛋白的重组卡介苗(recombinant BCG,rBCG).方法以pQE30-CFP10-ESAT6质粒为模板,通过PCR扩增633bp lhp-esat6基因,将该基因定向克隆到穿梭表达载体pJCH02中构建重组pJCH02-CFP10-ESAT6质粒.用电穿孔法将重组质粒导入BCG菌构建rBCG,将rBCG培养23天,于收菌前3天每天45℃热诱导45min,对表达产物作SDS-PAGE及免疫印迹分析.结果重组质粒pJCH02-CFP10-ESAT6经酶切及测序证实构建成功,并在BCG中经热诱导成功表达出了具有CFP10及ESAT6抗原性的CFP10-ESAT6融合蛋白.结论成功构建能表达CFP10-ESAT6融合蛋白的重组BCG,为发展新型结核病疫苗奠定了基础.
作者：陈全；朱道银；骆旭东；蒋英；江山
来源：中国人兽共患病杂志 2004 年 20卷 2期
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