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目的 克隆结核分枝杆菌蛋白Hsp16.3的基因,在大肠杆菌中进行表达.方法 以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,通过PCR方法对Hsp16.3的基因进行扩增,以pET30a为载体构建重组质粒,再转化到表达宿主菌BL21(DE3)中,以IPTG诱导表达.聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析蛋白表达形式.结果 构建了具有正确基因序列的Hsp16.3重组表达质粒,重组蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中表达.结论 目的 基因克隆入宿主菌中并表达成功,为深入研究该蛋白的生物学、免疫学活性奠定了基础.

作者:田绿波;罗垲炜;陈肖潇;吕冰;樊学军;张洋;万康林

来源:中国人兽共患病学报 2011 年 27卷 2期

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作者:
田绿波;罗垲炜;陈肖潇;吕冰;樊学军;张洋;万康林
来源:
中国人兽共患病学报 2011 年 27卷 2期
标签:
结核分枝杆菌 Hsp16.3 基因克隆
目的 克隆结核分枝杆菌蛋白Hsp16.3的基因,在大肠杆菌中进行表达.方法 以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,通过PCR方法对Hsp16.3的基因进行扩增,以pET30a为载体构建重组质粒,再转化到表达宿主菌BL21(DE3)中,以IPTG诱导表达.聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析蛋白表达形式.结果 构建了具有正确基因序列的Hsp16.3重组表达质粒,重组蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中表达.结论 目的 基因克隆入宿主菌中并表达成功,为深入研究该蛋白的生物学、免疫学活性奠定了基础.

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