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目的 通过SELEX(指数富集配基系统进化技术)筛选阪崎克罗诺菌特异性DNA适配子,为建立基于适配子技术的阪崎克罗诺菌快速检测方法奠定基础.方法 在阪崎克罗诺菌比较基因组分析、蛋白亚细胞定位预测、蛋白跨膜区预测分析、基因mRNA表达量分析、基因克隆表达和蛋白纯化基础上,制备用于适配子筛选的靶蛋白.利用靶蛋白偶联羧基磁珠,筛选ssDNA适配子.并对适配子的靶蛋白结合亲和力和目标菌捕获特异性进行分析.结果 适配子S1与靶蛋白结合亲和力较高,对阪崎克罗诺菌有较好捕获能力,捕获率最高为23.1%.对大肠埃希氏菌、沙门氏菌等非目标菌不具有明显的捕获能力,具有较好的阪崎克罗诺菌捕获特异性.结论 适配子S1和S2的二级结构以茎环结构和发夹结构为主.
作者:张云怡;梅玲玲;占利;陈鸿鹄;张俊彦;陈建才;张政
来源:中国人兽共患病学报 2020 年 36卷 1期
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