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目的:体外实验中检测小胶质细胞糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)的活性和Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)蛋白的表达,探究手术后认知障碍(post operative cognitive dysfunction ,POCD)的可能作用机制。方法原代培养小胶质细胞,倒置显微镜观察细胞形态,采用神经胶质酸性蛋白( glial fibrillary acidic protein,GFAP)免疫荧光法鉴定小胶质细胞;采用脂多糖( lipopolysaccharides,LPS)诱导小胶质细胞损伤,筛选最佳POCD造模条件;采用MTT法检测小胶质细胞活力;采用Western blot方法检测小胶质细胞中GSK-3β和TLR4蛋白的表达。结果 GFAP免疫荧光鉴定结果显示阳性,大鼠小胶质细胞的原代培养成功;MTT结果表明,最佳PODC造模条件为LPS(100 ng/mL)诱导小胶质细胞损伤7h;Western blot结果表明,与空白对照组相比,LPS可显著性地上调小胶质细胞内GSK-3β和TLR4蛋白的表达(P<0.01)。结论 PODC的发病机制可能与LPS上调小胶质细胞中GSK-3β和TLR4蛋白的表达有关。

作者:张波;吴世政;胡全忠;侯倩;才鼎;钱燕宁

来源:中国生化药物杂志 2015 年 4期

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作者:
张波;吴世政;胡全忠;侯倩;才鼎;钱燕宁
来源:
中国生化药物杂志 2015 年 4期
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术后认知障碍 糖原合成酶激酶-3β Toll样受体4 小胶质细胞 作用机制 postoperative cognitive dysfunction glycogen synthase kinase -3β Toll-like receptor 4 microglia mechanism
目的:体外实验中检测小胶质细胞糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)的活性和Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)蛋白的表达,探究手术后认知障碍(post operative cognitive dysfunction ,POCD)的可能作用机制。方法原代培养小胶质细胞,倒置显微镜观察细胞形态,采用神经胶质酸性蛋白( glial fibrillary acidic protein,GFAP)免疫荧光法鉴定小胶质细胞;采用脂多糖( lipopolysaccharides,LPS)诱导小胶质细胞损伤,筛选最佳POCD造模条件;采用MTT法检测小胶质细胞活力;采用Western blot方法检测小胶质细胞中GSK-3β和TLR4蛋白的表达。结果 GFAP免疫荧光鉴定结果显示阳性,大鼠小胶质细胞的原代培养成功;MTT结果表明,最佳PODC造模条件为LPS(100 ng/mL)诱导小胶质细胞损伤7h;Western blot结果表明,与空白对照组相比,LPS可显著性地上调小胶质细胞内GSK-3β和TLR4蛋白的表达(P<0.01)。结论 PODC的发病机制可能与LPS上调小胶质细胞中GSK-3β和TLR4蛋白的表达有关。

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