目的 研究α-硫辛酸(alpha-lipoic acid,ALA)联合青霉胺(Penicillamine,PCA)对Wilson病(Wilson disease,WD)模型TX乳鼠神经元P38 MAPK通路的调控机制.方法 本实验乳鼠神经元通过原代方法分离培养所得,分为正常对照组、模型组、ALA组、PCA组及联合组.采用流式细胞仪检测药物治疗前后活性氧释放量及JC-I荧光强度的变化;Western blot法检测经药物作用后P38丝裂原活化蛋白激酶、细胞色素C、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3蛋白的表达.结果 经流式细胞仪检测结果可知ALA、PCA及联合用药均能减少神经元内ROS释放量且其MFI分别为59.29± 1.22、53.19±1.34及52.46±1.23,增进JC-1的荧光强度(P＜0.01),且同ALA组和PCA组比,联合组ROS释放量明显降低,JC-1的荧光强度显著增强.Westernblot检测发现与正常组相比,模型组乳鼠神经元内P38MAPK,Cyt C,Caspase 9,Caspase 3蛋白含量显著增加(P＜0.01);与模型组相比,LA组、PCA组及联合组乳鼠神经元内P38 MAPK,Cyt C,Caspase 9,Caspase 3蛋白表达水平明显下降;联合组P38 MAPK,Cyt C,Caspase 9,Caspase 3蛋白含量较LA组及PCA组减少.结论 ALA联合PCA可促进铜排出,降低高铜诱导的线粒体损伤,降低高铜神经毒性,延缓神经元凋亡,改善WD神经系统损伤症状.

作者：徐陈陈；董健健；程楠；王训；喻绪恩

来源：中国神经精神疾病杂志 2017 年 43卷 8期