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为给转基因植物监测提供技术支持,建立了转基因"华番一号"番茄筛选和特异性的定性、定量PCR检测方法.转基因"华番一号"的筛选PCR检测主要以转基因通用元件CaMV35S启动子和NOS终止子为目的基因片段,特异性PCR检测以转基因外源重组子的CaMV35S启动子和反义EFE基因的相邻序列为目的片段;实验同时设立番茄的LAT52基因为转基因番茄定性、定量PCR检测的内对照基因.在所建立的PCR检测体系中,定性PCR筛选和特异性检测的检测极限为68个拷贝,实时定量PCR方法的检测极限为3个拷贝;筛选定量PCR检测的定量极限为3个拷贝,特异性定量PCR检测的定量极限为25个拷贝.最后通过对2个已知含量的转基因番茄"华番一号"混合试样的检测,证明了该体系可以有效地用于转基因番茄"华番一号"的筛选和特异性的定性、定量PCR检测.
作者：杨立桃；赵志辉；申慧峰；潘爱虎；张大兵
来源：中国食品卫生杂志 2005 年 17卷 2期
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