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以17α-甲基睾丸酮(17α-MT)饲喂2~4龄赤点石斑鱼(Epinephelus akaara),成功地促使其性转变为具有生殖功能的雄鱼.应用抑制性差减杂交(SSH)技术构建了石斑鱼性反转前后性腺组织的SMART cDNA文库及其cDNA差减文库,从中随机挑取1200个克隆进行了PCR和斑点杂交筛选,得到120个差异表达cDNA片段.挑选71个cDNA克隆测序,将所测序列经GenBank检索和生物信息学比较,发现有51个cDNA片段序列无明显的同源性,20个片段与报道的基因有较高同源性.在这20个具同源性的片段中有3个片段可能是与性别分化密切相关的重要功能基因,它们是钙调蛋白基因、活性蛋白激酶C受体基因和一氧化氮合酶蛋白抑制剂基因.这3个基因被分别命名为鱼钙调蛋白基因(GenBank accession:AY281363)、鱼活性蛋白激酶C受体基因(GenBank accession:AY281364)和鱼一氧化氮合酶蛋白抑制剂基因(GenBank accession:AY281365).

作者:李尚伟;文建军;庞岚;刘世贵

来源:中国生物化学与分子生物学报 2004 年 20卷 2期

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作者:
李尚伟;文建军;庞岚;刘世贵
来源:
中国生物化学与分子生物学报 2004 年 20卷 2期
标签:
石斑鱼 性逆转 抑制性差减杂交 克隆与筛选
以17α-甲基睾丸酮(17α-MT)饲喂2~4龄赤点石斑鱼(Epinephelus akaara),成功地促使其性转变为具有生殖功能的雄鱼.应用抑制性差减杂交(SSH)技术构建了石斑鱼性反转前后性腺组织的SMART cDNA文库及其cDNA差减文库,从中随机挑取1200个克隆进行了PCR和斑点杂交筛选,得到120个差异表达cDNA片段.挑选71个cDNA克隆测序,将所测序列经GenBank检索和生物信息学比较,发现有51个cDNA片段序列无明显的同源性,20个片段与报道的基因有较高同源性.在这20个具同源性的片段中有3个片段可能是与性别分化密切相关的重要功能基因,它们是钙调蛋白基因、活性蛋白激酶C受体基因和一氧化氮合酶蛋白抑制剂基因.这3个基因被分别命名为鱼钙调蛋白基因(GenBank accession:AY281363)、鱼活性蛋白激酶C受体基因(GenBank accession:AY281364)和鱼一氧化氮合酶蛋白抑制剂基因(GenBank accession:AY281365).

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