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目的 研究双质粒HBV DNA疫苗工程菌的中试发酵工艺.方法 首先通过计算质粒拷贝数,检测工程菌DH5α/pS2.S和DH5α/pFP在传代过程中的遗传稳定性,通过摇瓶培养确定培养基组成,再在30 L发酵罐内,通过改变培养基成分、培养时间、补料方式,确定最佳发酵参数.并将确定的最佳发酵参数应用于50 L发酵罐连续3批中试规模的发酵,同时考察在发酵培养过程中质粒稳定性和超螺旋质粒DNA的比例.结果 工程菌DH5α/pS2.S和DH5α/pFP在连续传代30次后,质粒拷贝数保持稳定.确定最佳发酵参数为以甘油为碳源的培养基培养,梯度恒速流加方式补料,培养时间为10 h.通过3批稳定发酵,最终可获得湿菌58.0～71.8 g/L,质粒含量可达到1.11～1.58 mg/g菌,超螺旋质粒DNA的比例达93
作者：饶桂荣；黄英；王鹏；何晓嫱；杨富强；莫国玉；陈光明
来源：中国生物制品学杂志 2007 年 20卷 2期
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