目的 研究乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)X蛋白(HBx)对小鼠胚胎肝干细胞(embryonic liver stem cell,ELSC)凋亡及相关蛋白Bcl2、Mcll、Bax表达的影响.方法 采用表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的腺病毒载体系统将HBx基因转入小鼠胚胎肝干细胞ELSC14.5中,采用RT-PCR和Western blot法检测细胞中HBx基因mRNA的转录和蛋白的表达；Hoeehst33342染色法观察细胞核的改变；TUNEL法和流式细胞术检测细胞的凋亡情况；Real-time PCR和Western blot法检测抗凋亡因子Bcl2、Mcl1和促凋亡因子Bax基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平.结果 重组腺病毒Ad-GFP-HBx能有效感染EISC14.5细胞,HBx基因和蛋白均能特异性表达；感染的ELSC14.5细胞核呈现固缩,且边缘化的细胞数减少,细胞凋亡率降低；细胞中Bcl2和Mcl1基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平均增高,而Bax的表达降低.结论 HBx可通过调节Bcl2家族中抗凋亡因子和促凋亡因子的比例失衡,来抑制小鼠胚胎肝干细胞的凋亡,促进其存活.
作者：申利红；芦永良；李红丽；冯涛；黄佳祎
来源：中国生物制品学杂志 2013 年 26卷 6期
