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目的 制备福氏2a志贺菌O-特异性多糖蛋白结合物,并检测其免疫原性.方法 水解的福氏2a志贺菌O-特异性多糖在碳二亚胺[1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride,EDAC]的介导下,与己二酰二肼(adipic acid dihydrazide,ADH)缩合,制备衍生物,再与破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)结合制备福氏2a志贺菌O-特异性多糖蛋白结合物(以下简称结合物),并检测各项生化指标.分别用多糖、本实验制备结合物、氰基活化法和氨还原法制备的结合物免疫小鼠,0.2ml/只(含2μg多糖),共免疫3次,每次免疫2周后检测小鼠血清抗体滴度,并计算抗体几何平均滴度(GMT).结果 结合物游离多糖和游离蛋白含量均较低,内毒素含量合格,KD值由约0.85(多糖)降至0.02(结合物).各结合物均可诱导小鼠产生特异性抗体,且各组间GMT差异无统计学意义(P>0.05),各针次间GMT均有显著提高(P<0.05).结论 本实验制备的福氏2a志贺菌O-特异性多糖蛋白结合物具有良好的免疫原性,且制备方法步骤简单,反应条件温和,适合用于规模化生产.

作者:朱卫华;宗向坤;胡小华;胡月凤;杜琳

来源:中国生物制品学杂志 2015 年 28卷 6期

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作者:
朱卫华;宗向坤;胡小华;胡月凤;杜琳
来源:
中国生物制品学杂志 2015 年 28卷 6期
标签:
福氏2a志贺菌 多糖 蛋白质 结合物 免疫原性 Shigella flexneri 2a Polysaccharide Protein Conjugate Immunogenicity
目的 制备福氏2a志贺菌O-特异性多糖蛋白结合物,并检测其免疫原性.方法 水解的福氏2a志贺菌O-特异性多糖在碳二亚胺[1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride,EDAC]的介导下,与己二酰二肼(adipic acid dihydrazide,ADH)缩合,制备衍生物,再与破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)结合制备福氏2a志贺菌O-特异性多糖蛋白结合物(以下简称结合物),并检测各项生化指标.分别用多糖、本实验制备结合物、氰基活化法和氨还原法制备的结合物免疫小鼠,0.2ml/只(含2μg多糖),共免疫3次,每次免疫2周后检测小鼠血清抗体滴度,并计算抗体几何平均滴度(GMT).结果 结合物游离多糖和游离蛋白含量均较低,内毒素含量合格,KD值由约0.85(多糖)降至0.02(结合物).各结合物均可诱导小鼠产生特异性抗体,且各组间GMT差异无统计学意义(P>0.05),各针次间GMT均有显著提高(P<0.05).结论 本实验制备的福氏2a志贺菌O-特异性多糖蛋白结合物具有良好的免疫原性,且制备方法步骤简单,反应条件温和,适合用于规模化生产.

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