目的 建立能够进行定性及定量分析的人用狂犬病疫苗(Vero细胞)原液宿主残余DNA检测的qPCR法,并进行验证.方法 用Vero细胞DNA定量国家标准品建立qPCR标准曲线,磁珠法提取Vero细胞残余DNA.对该方法进行专属性、重复性、中间精密度、准确度及耐用性验证,并确立线性范围及定量限.用该方法对3批人用狂犬病疫苗(Vero细胞)原液残余DNA进行定量分析及片段大小定性分析.结果 采用qPCR法检测Vero细胞DNA定量国家标准品,标准曲线相关系数(R2)均＞0.99,DNA检测范围为0.3 pg/mL～30 ng/mL.该方法专属性、重复性好,中间精密度、准确度及耐用性验证中,样品检测结果的相对标准偏差(RSD)均＜10％.3批原液Vero细胞残余DNA含量为0.20～0.77 ng/剂,符合《中国药典》三部(2020版)相关标准;残余DNA＞154 bp的片段占52％～63％.结论 建立的方法专属性、重复性、中间精密度、耐用性好,可快速、准确地进行残余DNA的定性及定量分析,对人用狂犬病疫苗(Vero细胞)生产过程中和最终产品残余DNA含量的检测及控制具有重要意义.
作者：刘利强；包小华；周慧明；曾智；刘建华；张海平；迟宝琦；汪树生；刘大维
来源：中国生物制品学杂志 2023 年 36卷 6期
